冻干机在人工皮肤领域的应用

 皮肤是人体zui大的器官，是外源化学因素(化学品、药品等)或物理机械因素(紫外线)毒性作用的器官。传统的皮肤安全性评价实验不仅要求一定数量的动物，而且试验周期长，成本高。随着冻干技术的出现，利用冻干机制备人工皮肤的方法，该方法培养周期短，皮肤功能和活性在体外维持时间长。能满足毒性检验领域的需要。

  利用冻干机制备的人工皮肤可用于进行皮肤毒性测试是药品、食品添加剂 及原料、农药、生物制品、化学品健康安全评价的常用检测项目。

  制作由胶原与细胞外基质混合物组成的复合胶原支架：

1、在无菌条件下将胶原浸泡于冰冷-4'C、 0. 1%的醋酸溶液中，胶原浓度 为8-10mg/Ml范围，调节PH值到7. 2 — 7.3制备胶原溶液，操作应在4"进行；

2、在胶原溶液中加入L)步骤所得的细胞外基质混合物，得到复合胶原溶液，复合胶原溶液中细胞外基质混合物与胶原的质量比例为2-2. 5: 7. 5-8;

3、取Lml制备好的复合胶原溶液置于孔径为3.5 Cm的圆形模具中或6 孔细胞培养板中，用0. Lml的1%—1.5%的戊二醛溶液4'C共价交联24士0. 5 小时，用0. 1mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗2-3次，制成海绵状复合胶原 基质；

将复合胶原基质用波长254nm、36W的紫外线照射除菌后放置在低温冰箱冷冻过12-18小时，然后再在真空低温条件下，冻干机?真空冷冻干燥24土1小时，即可得到制备复合胶原支架。

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